Публикации

Подпишитесь сейчас и получите код купона -50.

Paste the Mailchimp shortcode here.

Схема темнопольной микроскопии впадающем свете.
Подсветка образца осуществляется сбоку (зеленая линия). Изображение создается светомрассеивающимся   на неоднородностях образца.

Темнопольная микроскопия — вид оптической микроскопиив которой контраст изображения    увеличивают за счет регистрации только светарассеянного изучаемым образцомПри использовании  метода темного поля регистрируются даже незначительные различия в преломляющей способности   участков препаратаОсновы метода разработаны РЗигмонди в 1906 году.

Принцип 


В
 оптической микроскопии тёмного поля неоднородности образца рассеивают свети этот рассеянный свет  формирует изображение исследуемого образца.

Особенностью микроскопа темного поля является способ освещения образцакоторый осуществляется     «сбоку» (зеленая полоса на рисунке). При таком освещении неоднородностиимеющиеся в образцерассеивают падающий свет и в микроскопе изображение образца наблюдают в рассеянном светеа освещающий свет «напрямую» не попадает в объективТакое освещение называется эпиподсветкой (EPIilluminatorEPImicroscopeEPIobjective lens).

Для прозрачных объектов возможно и контровое освещениено при этом необходимы дополнительные   действиячтобы убрать “прямое поле: необходимо провести фурье-преобразование полученного изображения и удалить из полученной суммы компонентусоответствующую “опорной” волнеЭто можно сделатьнапримерс помощью линзы и шаблоназакрывающего небольшой участок в плоскостигде линзой фокусируется “опорная” световая волнаЗатемс помощью второй линзы проводят обратное преобразование Фурье и наблюдают полученную картину визуальноПри этом контраст исходного изображения существенно возрастает.

В микроскопах использование метода тёмного поля может быть предусмотрено конструкцией или          реализуется установкой дополнительных узловтакихкак конденсор темного поля ОИ13.

Преимущества и недостатки

Изображение мизидыполученное способом темнопольной микроскопии

Темнопольная микроскопия хорошо подходит для получения изображений живых и неокрашенных   биологических образцовтакихкак отдельные водные одноклеточные организмы.

Основным ограничивающим фактором метода является точто только малая часть падающего света в итоге формирует изображениепоэтому необходимо применять достаточно мощные источники светачто иногда  приводит к повреждениям образца (сейчас иногда используют лазеры).

Темнопольная микроскопия практически лишена артефактовОднакоинтерпретация получаемых  изображений требует большой осторожностипоскольку некоторые деталине видные методом   светлопольной микроскопиивидны методом темнопольной микроскопиии наоборотНа первый взгляд   можно было бы сделать предположениечто изображениеполучаемое темнопольным методом является   просто негативом по отношению к получаемым светопольным методомоднакона самом делекаждый из   этих методов делает видимым разные особенности образцаВ светлопольной микроскопии особенности   видимыесли они или производят тениили имеют отличный от окружения коэффициент преломления и   при этом достаточно резкиев то время какнапримерплавные неоднородности не могут быть   наблюдаемы этим методомоднакохорошо заметны на картинкахполучаемых методом темнопольной   микроскопии.

Применение

Темнопольная микроскопия может применяться для прижизненного изучения неокрашенных   биологических объектов — простейшихизолированных клетоктканевых культурдля исследования   субклеточных  неокрашенных клеток.

Темнопольная микроскопия в последнее время используется в производстве компьютерных мышей с тем чтобы обеспечить работу оптических мышей в том числе и на прозрачных стёклахимеющих              микроскопические дефекты или пыль на поверхности.

{{{box_caption}}}             {{{box_caption}}}
Одна и та же полированная алмазная пластинка: слева — при наблюдении методом светлого полясправа — методом тёмного поля.

 

Оставить комментарий

Ваш электронный адрес не будет опубликован.

Корзина пуста.